鬼笔环肽及偶联物(Phalloidin and Phalloidin Conjugates)

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  • 2019年8月11日
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鬼笔环肽及偶联物(Phalloidin and Phalloidin Conjugates

◎ FORSTAINING ACTIN肌动蛋白染色探针 ◎    

◎ 搜索关键词:

Phalloidin 鬼笔环肽;F-actin肌动蛋白(聚合);G-actin 球形肌动蛋白(单体);Actin Polymerization 肌动蛋白聚合;Cytochalasin 细胞松弛素;CAS NO.:17466-45-4;

 

◎ 背景介绍:

肌动蛋白(Actin)是一种分子量~42kDa的细胞骨架蛋白,几乎存在所有真核细胞中。也是一种最高度保守蛋白,藻类和植物之间序列差异不超过20%。肌动蛋白是细胞中两种纤维的单体亚基:微丝(Microfilaments),又称肌动蛋白丝(Actin filaments),细胞骨架三种主要成分之一;细肌丝(Thin filaments),肌肉细胞收缩丝的一部分。因此,肌动蛋白参与许多重要的细胞生理过程,包括肌肉收缩、细胞运动、细胞分化和胞质分裂、囊泡和细胞器运动、细胞信号,以及细胞连接和细胞形状的搭建和维持。

单体形式存在的称为球形肌动蛋白(Globular actin,G-actin),具有紧密的结合位点介导其与另外两个单体肌动蛋白进行头-尾相互作用,从而使得单体激动蛋白聚合形成纤维(Filamentous actin,F-actin)【见图1.肌动蛋白丝的组装和结构】。

 

图1. 肌动蛋白丝的组装和结构。(A)G-actin聚合形成F-actin。第一步生成二聚体和三聚体,然后通过逐步添加单体蛋白到两端来生长。(B)G-actin的结构。

鬼笔环肽(Phalloidin),又称鬼笔鹅膏素,是从毒蘑菇鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)中分离到的一种七肽毒素,以极高的亲和力和特异性结合肌动蛋白丝F-actin(聚合形式的肌动蛋白),不会结合单体肌动蛋白(G-actin)。不像一些肌动蛋白抗体,同时识别单体和聚合形式的肌动蛋白。鬼笔环肽使得肌动蛋白聚合/解离的临界浓度降低至1μg/ml,可用作一种聚合增强剂。产生的复合物高度稳定(解离常数约为3×10–8M),从而抵抗去聚合和去组装活性。

本公司提供一系列常用的科研用途鬼笔环肽及其荧光偶联物,颜色涵盖全部的可见光光谱区间。如此丰富的鬼笔环肽偶联物满足用户多重需求,且基本现货供应,欢迎来电咨询,电话:021-54736159,QQ:2716000500。

◎ 产品应用:

1)用来标记、鉴定和定量肌动蛋白丝(F-actin);

2)体外稳定肌动蛋白丝(F-actin);

3)体外观察固定或活细胞中肌动蛋白丝(F-actin)的定位、分布,以及观测单一的F-actin;

4)高分辨率下研究肌动蛋白网络;

◎ 产品特点:

1)应用范围广:甲醛固定和透化处理的组织切片、培养细胞,以及无细胞实验体系;无物种差异性;

2)亲和力高、稳定性强:解离常数Kd约3×10–8M;

3)特异性强:特异结合F-actin,不会结合G-actin,背景明显低于Actin抗体染色,几乎无特异性染色,且不受物种限制。

4)毒性小:鬼笔环肽及衍生物分子量小,对F-actin影响小。经标记后的F-actin仍维持许多未标记actin的功能特征包括与肌球蛋白的相互作用。

5)灵敏度高:nM浓度即可达到染色需求;

6)适合多重标记实验:提供多种鬼笔环肽荧光偶联物,选择范围广,能实现多重标记;

◎ 染色流程【图2】:

 

◎ 染色示例:

 
图3. Jasplakinolide (Jas)或Cytochalasin D (Cyto D)对HSC-T6细胞肌动蛋白骨架重组的生理效应。HSC-T6细胞分别经DMSO (vehicle control),Jas (100 nM) or Cyto D (1 μM)处理1h,之后4%多聚甲醛固定15 min。之后phalloidin-FITC(MX4403)染色肌动蛋白丝,细胞核用DAPI(MX4207)复染。荧光显微镜下成像检测

 

图4. HeLa细胞经iFluor™ 488 Phalloidin染色后荧光显微

镜检测图(FITC滤片设置-绿色)。

  

图5. HeLa细胞经iFluor™ 647 Phalloidin染色后荧光显微镜检

测图(Cy5滤片设置-红色)。

◎ 产品订购:高品质鬼笔环肽及偶联物系列产品,让你的实验数据“美”起来!!欢迎来电咨询,电话:021-54736159,QQ:2716000500。

产品编号             

产品名称                                       规格                  Ex/Em              价格(元)        

MX4401-1MG

Phalloidin 1mg N/A 3188
MX4402-1MG Amino Phalloidin 1mg N/A

7480

MX4403-300T

FITC Phalloidin 300T 492/518 788
MX4404-1MG FITC Phalloidin 1mg 492/518

5128

MX4405-300T

TRITC Phalloidin 300T 546/575 788
MX4406-1MG TRITC Phalloidin 1mg 546/575

5128

MX4407-1MG

5-TAMRA Phalloidin 1mg 542/568 5188
MX4408-300T iFluor™ 350 Phalloidin 300T 353/442

2088

MX4409-300T

iFluor™ 405 Phalloidin 300T 400/421 2088

MX4410-300T

iFluor™ 488 Phalloidin 300T 492/518

2088

MX4411-300T

iFluor™ 555 Phalloidin  300T 556/574 2088

MX4412-300T

iFluor™ 594 Phalloidin 300T 590/618

2088

MX4413-300T iFluor™ 647 Phalloidin 300T 650/665

2088

MX4414-300T iFluor™ 680 Phalloidin 300T 681/698

4388

MX4415-300T iFluor™ 790 Phalloidin  300T 787/808

4388

【注】:iFluor™系列的荧光光谱同Alexa Fluor™系列,荧光稳定性和荧光强度几乎与Alexa Fluor™一致,是传统荧光探针FITC, TRITC, 5-TAMRA等的升级品。

◎ 相关产品:【见我司整理的细胞松弛素Cytochalasin产品专题】。

货号                    产品名称                                      CAS NO.               规格                  价格(元)      
MZ5801-1MG Cytochalasin B 细胞松弛素B 14930-96-2 1mg 539
MZ5801-5MG Cytochalasin B 细胞松弛素B 14930-96-2 5mg 1478
MZ5802-1MG Cytochalasin D 细胞松弛素D 22144-77-0 1mg 1088
MZ5802-5MG Cytochalasin D 细胞松弛素D 22144-77-0 5mg 4158
MZ5803-1MG Cytochalasin A 细胞松弛素A 14110-64-6 1mg 698
MZ5804-1MG Cytochalasin C 细胞松弛素C 22144-76-9 1mg 1158
MZ5805-1MG Cytochalasin E 细胞松弛素E 36011-19-5 1mg 728
MZ5806-1MG Cytochalasin H 细胞松弛素H 53760-19-3 1mg 1528
MZ5807-1MG Cytochalasin J 细胞松弛素J 53760-20-6 1mg 1528

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】