描述
VECTASTAIN ABC试剂可用于检测任何生物素化分子。这是原始的抗生物素蛋白/生物素ABC复合物形成而没有生物素化的第二抗体。
特征:
- 碱性磷酸酶检测系统
- 抗生物素蛋白/生物素技术
- 高灵敏度/低背景
- 优选具有高内源性过氧化物酶活性的组织
- 提供其他基板选择
- 在多种抗原标记应用中用作第二标记
技术指标
单位大小 | 1套 |
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应用领域 | 免疫组织化学/免疫细胞化学,原位杂交,印迹应用,Elispot,ELISA |
技术 | ABC(抗生物素蛋白/生物素)系统 |
检测酶 | 碱性磷酸酶 |
目标物种 | 不包含抗体 |
格式 | 集中 |
套件内容
- 2 ml试剂A(抗生物素蛋白DH)
- 2 ml试剂B(生物素化AP)
技术信息
VECTASTAIN ABC系统以其超过50,000次引用而受到广泛好评。该模块化系统基于通用的抗生物素蛋白-生物素相互作用,并与我们选择的第二抗体一起,可以容纳各种各样的第一抗体和组织物种。我们的ABC试剂盒是任何免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学(ICC)实验室中经济实惠的主打产品。
的VECTASTAIN ABC-AP系统的灵敏度是比得上的过氧化物酶VECTASTAIN精英® ABC系统,但可优选用于具有高内源性过氧化物酶活性的组织。该系统还提供其他基材颜色选择。
VECTASTAIN ABC-AP试剂盒
试剂A和B混合后会形成ABC-AP复合物。
每个试剂盒足以染色大约1,000–2,000个切片或五十个100 cm 2印迹。
抗生物素蛋白-生物素复合物方法
由于与预先形成的抗生物素蛋白/生物素化酶复合物相关的活性酶分子的形式和数量,VECTASTAIN ABC系统极为敏感。这种ABC复合物利用了抗生物素蛋白的两个重要特性:1)对生物素的极高亲和力(对大多数抗原而言,比抗体高一倍以上),以及2)四个生物素结合位点。这些特性允许在使用前通过将抗生物素蛋白DH(试剂A)与其配对的生物素化酶(试剂B)混合来形成大分子复合物(ABC)。ABC试剂一旦形成,在形成后可保持稳定数小时,并且在制备后可使用数天。
您可以使用VECTASTAIN ABC试剂来检测几乎任何被生物素化的分子。在以下应用中,使用它来可视化生物素化的抗体,凝集素,神经元示踪剂,核酸和配体:
- 组织染色
- 多重标记(Multiplex IHC)
- 蛋白质印迹
- 南部和北部的印迹
- 原位杂交检测(ISH)
- 酶免疫法(ELISA)
- 神经元追踪
所有应用都受益于VECTASTAIN ABC系统的高灵敏度,低背景,可重复性和经济性。
选择VECTASTAIN ABC套件
1)选择一种酶系统。
VECTASTAIN ABC试剂盒提供两种不同的酶系统供您选择:
- 辣根过氧化物酶,HRP(ABC,Elite ABC,RTU或试剂盒)
- 碱性磷酸酶,AP(ABC-AP)
2)选择一种生物素化的二抗。
要检测生物素化的靶标,请使用标准试剂盒中包含的ABC试剂,然后使用合适的底物。
要检测未标记的一抗,请使用与所选一抗种类,ABC试剂和适当底物结合的生物素化二抗。例如,要检测兔中产生的一抗,合适的选择是VECTASTAIN ABC试剂盒,命名为“兔IgG”。
为了提供更多的通用性和便利性,Vector Laboratories提供了可识别一种以上一级抗体的二级抗体产品:
- 通用生物素化抗小鼠/兔IgG二抗(目录号BA-1400)—生物素化抗鼠IgG和抗兔IgG的混合物,设计用于兔和小鼠一抗。由于该抗体与这些物种的组织中存在的IgG具有反应性,因此请勿使用该抗体对啮齿动物或兔子的组织进行染色。
- 泛泛特异性抗小鼠/兔/山羊二抗(目录号BA-1300)—包含在我们的VECTASTAIN通用试剂盒中,这种生物素化的抗小鼠IgG,抗兔IgG和抗山羊IgG混合物可识别小鼠,兔和山羊的一抗。由于与内源性IgG的潜在反应性,请勿使用该二抗染色大鼠,小鼠或其他啮齿动物,兔,山羊,牛或绵羊的组织。
3)选择一种方便的格式。
为了方便和易于使用,请在预先稀释的稳定格式中进行选择。请参阅指定为RTU或即用型的套件。
4)考虑物种交叉反应。
在为您的应用选择最佳检测系统时,不仅要考虑一抗的种类,还要考虑被检查组织的种类。如果这两个物种密切相关(例如大鼠和小鼠),则生物素化的二抗可能会与组织切片中的内源性IgG发生交叉反应,从而导致背景染色。在以下情况下,以下三种选择可将背景染色降至最低:
- 生物素化一抗,并使用标准VECTASTAIN Elite ABC试剂盒PK-6100(仅包括抗生物素蛋白-生物素复合物或ABC试剂)进行检测。
- 使用吸附的生物素化的二抗去除密切相关物种的交叉反应抗体(例如,生物素化的抗小鼠IgG,大鼠吸附,目录号BA-2001)。
- 使用MOM ®免疫检测系统使用鼠标鼠标组织的主要抗体。
5)选择基材。
在为您的应用选择VECTASTAIN ABC试剂盒后,选择与该试剂盒的酶系统匹配的底物。
(内容来自vector官方文本,中文翻译仅供参考!)