描述
Nitrocefin 头孢硝噻吩
产品标签
Nitrocefin 头孢硝噻吩;Cephalosporin 头孢菌素;beta-lactamases β-内酰胺酶活性;β-内酰胺类抗生素耐药菌筛选;CAS:41906-86-9
产品信息
产品名称 |
产品编号 | CAS NO | 规格 | 价格(元) |
Nitrocefin 头孢硝噻吩 |
MS0015-1MG | 41906-86-9 | 1mg |
650 |
Nitrocefin 头孢硝噻吩 | MS0015-5MG | 41906-86-9 | 5mg |
1250 |
产品描述
头孢硝噻吩(Nitrocefin,CAS NO:41906-86-9),具有显色特性的一种头孢菌素(cephalosporin),通常用来检测由β-内酰胺类抗生素耐药菌代谢产生的β-内酰胺酶(beta-lactamases)活性。作用机制在于:几乎所有β-内酰胺酶能水解头孢硝噻吩β-内酰胺环上羰基碳和氮基间的酰胺键,这一过程通过颜色的变化可用肉眼来判断。完整结构的头孢硝噻吩处于紫外吸光区(~380nm,黄色),酶解产物迁移到可见光光谱区(~500nm,红色)。
产品特性
1. CAS NO:41906-86-9
2. 化学名:(6R)-3-[(1E)-2-(2,4-dinitrophenyl)ethenyl]-8-oxo-7R-[(2-thienylacetyl)amino]-5-thia-1-azabicyclo [4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid
3. 同义名:Nitrocephin
4. 分子式:C21H16N4O8S2
5. 分子量:516.51
6. 纯度:≥95%(HPLC)
7. 外观:橘色粉末
8. 溶解性:DMSO(30 mg/ml)、DMF(30 mg/ml)
9. 化学结构图:
保存与运输方法
保存:-20°C避光保存,储存于惰性气体下。至少2年稳定。
运输:冰袋运输。
使用方法
1. 头孢硝噻吩储存液(10mg/ml)制备
a)使用前从冰箱内取出产品置于室温回温至少20min并进行低速离心;b)吸取100μl高质量DMSO加入1mg头孢硝噻吩,充分溶解并混匀。可按照单次用量分装后,-20°C避光保存。
2. 头孢硝噻吩工作液(1mg/ml)制备
头孢硝噻吩的典型工作浓度为0.5-1.0mg/ml,此制备物一般呈黄色。
取20μl头孢硝噻吩(10mg/ml)储存液加入180μl PBS缓冲液(0.1M,中性pH),混匀后,即得到头孢硝噻吩(1mg/ml)工作液。多余的工作液可置于-20°C避光保存,必须在2周用完。
3. 快速检测分析
一旦接触β-内酰胺酶产生菌,待检样本一般可快速产生阳性反应。通常建议20-30min的反应时间,同时设置阴性对照。
3.1 玻片表面分析法
a)吸取一滴头孢硝噻吩工作液(1mg/ml)到干净的玻璃载玻片表面;b)使用无菌接种环挑取一固体培养克隆,并与液滴混匀;c)若20-30min内能观察到红色,表明β-内酰胺酶活性。【若有必要,可多滴头孢硝噻吩工作液,防止干燥】
3.2 直接接触分析法
a)直接吸取一滴头孢硝噻吩工作液(1mg/ml)到分离菌落表面;b)若20-30min内能观察到红色,表明β-内酰胺酶活性。
3.3 肉汤培养液分析法
a)取1ml肉汤培养液,加入3-5滴头孢硝噻吩工作液(1mg/ml);b)若20-30min内能观察到红色,表明β-内酰胺酶活性。
3.4 细胞裂解液分析法
a)超声裂解1ml细胞悬液;b)加入3-5滴头孢硝噻吩工作液(1mg/ml)到裂解悬液;b)若20-30min内能观察到红色,表明β-内酰胺酶活性。
3.5 滤纸分析法
a)将一小片滤纸片(~3 x 3 cm)饱和吸收头孢硝噻吩工作液(1mg/ml),然后置于干净的培养皿内;b)跳取一分离的克隆,并涂抹到浸渍滤纸片上;c)若20-30min内能观察到红色,表明β-内酰胺酶活性。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】