描述
Leadmium™ Green AM dye 铅离子(镉离子)绿色荧光探针
订购信息:
货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) | 规格 | 价格(元) |
A10024 | Leadmium™ Green AM dye 绿色 | 490/520 | 50 µg | 900.00 |
以上产品均为Life(Invitrogen)原装正品,我司对A10024进行拆开销售,特惠价为900元/支,单支50µg,现货销售,欢迎订购。
【温馨提示】:见我司整理的金属离子【钙,钾,钠,锌,镁,氯,铅离子】荧光染色探针产品专题。
基本介绍:
Leadmium™ Green AM dye(铅离子/镉离子绿色荧光探针)是Life旗下品牌Molecular Probe的专利产品,是一种独特的工具用来高度特异性和高灵敏度的检测细胞内铅离子(lead)和镉(cadmium)水平。当溶液内铅离子和镉离子测定的标准实验建立后,这一独特的Leadmium™ Green AM探针能特别设计用来检测活细胞内这些有毒的环境污染重金属。
产品特点
1) 高特异性探针(指示剂)用来检测细胞内铅和镉水平;
2) 灵活的检测方式,适用于流式细胞仪、荧光显微镜成像和荧光酶标板检测;
3) 明亮的荧光和高度鉴别镉离子,能检测到纳摩尔(nM)水平的铅离子和微摩尔(µM)水平的镉离子;
4) 检测方便,只需用488nm激光激发即可;
5) 探针轻易加载进入细胞,进入细胞内经酯酶水解后能极好的保存在细胞内。
产品保存
一旦收到本品,置于≤-20℃保存。一旦配制,Leadmium™ Green AM dye溶液(in DMSO)请在一天内用完。
实验前试剂准备
1、需要的材料(自行准备)
生理盐水(0.85% NaCl)【不能使用PBS】; DMSO(高质量,无水,如Cat#:MS4601-100mL)
2、 其他试剂(自行准备)
PbCl2溶液;CdCl2溶液;TPEN(tetrakis-(2-pyridylmethyl)ethylenediamine);乙醇;
离子霉素钙盐(货号:MZ2152-1MG);死细胞染料比如碘化丙啶(Cat#:MX4205-10MG)。
3、 试剂准备
3.1 从冰箱内取出一管Leadmium™ Green AM dye(50 µg),让其回温到室温,避光保存。
3.2 往管子内加入50µl 高质量无水的DMSO(Cat#:MS4601-100mL),避光混匀,使其充分溶解。
3.3 用生理盐水按照1:10的比例将Leadmium™ Green AM dye的DMSO储存液稀释成工作液(比如取20µl 储存液加到180µl生理盐水,混匀),所有溶液制备过程一直避光。
3.4 37℃温育生理盐水,用于后续多个步骤的清洗过程。
3.5 【可选】如果此实验需要设置相对对照(用已经浓度的PbCl2处理细胞),建议PbCl2的起始浓度范围是1nM-625nM。制备625nM PbCl2【添加250µl 10µM PbCl2到3.75ml生理盐水。然后做9次连续性梯度稀释最终得到1nM PbCl2】。37℃保存这些溶液直到需要。每个浓度需要1ml量。
3.6 【可选】如果此实验需要设置相对对照(用已经浓度的CdCl2处理细胞),建议CdCl2的起始浓度范围是1µM-250µM。制备250µM CdCl2【添加1ml 1mM CdCl2到3ml生理盐水。然后做8次连续性梯度稀释最终得到1µM CdCl2】。37℃保存这些溶液直到需要。每个浓度需要1ml量。
3.7 【可选】制备10mM TPEN工作液,通过添加1.2ml无水乙醇到5mg TPEN。混匀,室温保存。
操作流程【流式分析,具体leadmium Green AM dye Manual】
应用实例:
Figure 1. Dual-color scatter plot showing two populations. Jurkat cells were loaded with Leadmium™ Green AM dye and washed. The sample was then incubated in the presence of 1 µM PbCl2 (in saline) and 1 µM ionomycin. After washing the sample, it was incubated in the presence of PI. Dual-color fluorescence was collected using 488 nm excitation and 525/10 nm and 610/10 nm bandpass filters. This results in visualization of two populations: dead cells (positive for PI) and live cells that contain lead (positive for Leadmium™ Green dye and negative for PI).
发表文献(A10024):
Cellular sequestration of cadmium in the hyperaccumulator plant species Sedum alfredii. PubMed ID: 22025609
A new ABC half-transporter in Leishmania major is involved in resistance to antimony. PubMed ID: 23716044
Increased nuclear thioredoxin-1 potentiates cadmium-induced cytotoxicity. PubMed ID: 22961094
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】