描述
HypoxyprobeTM-1 Kit 缺氧探针检测试剂盒
搜索关键词:
Hypoxyprobe, Inc.(缺氧探针公司);Pimonidazole HCl;缺氧标志物(Hypoxia maker);Chemicon Inc.;
产品应用:
免疫化学法检测细胞和组织缺氧情况,包括免疫荧光(IF),免疫过氧化物酶,WB或流式细胞分析(FC);
试剂盒组分:
编号 |
组分名称 | 货号(规格) | 保存方法 | ||
HP1-100Kit |
HP1-200Kit |
HP1-1000Kit |
|||
1 |
Pimonidazole HCl | 100mg | 200mg | 1000mg |
室温或2-8℃避光 |
2 | 4.3.11.3 mouse MAb | 1ml | 1ml | 1ml |
-20℃,避免反复冻融 |
试剂盒组分详细描述:
一、Hypoxyprobe-1
Hypoxyprobe-1是2-硝基咪唑的替代物,其化学名和唯一成分是Pimonidazole hydrochloride(Pimonidazole HCl),分子量为290.8,水溶性为400mM(=116 mg/ml),紫外吸收(324nm)的吸光系数为7020(0.9%生理盐水)。
Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化学稳定性。比如,固体形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光线下室温保存2年,UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。溶于0.9%生理盐水的Hypoxyprobe-1,浓度100g/L置于2-8℃保存4.5年,UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。
作用机理:缺氧细胞中Pimonidazole被还原后得以活化。这一活化的中间物与蛋白质、多肽和氨基酸中的巯基基团(thiol groups)形成稳定的加合物。Mab1抗体结合这些加合物从而能借由免疫化学法来检测。
二、MAb1抗体
MAb1是小鼠IgG1单克隆抗体(克隆4.3.11.3),为杂交瘤细胞克隆4.3.11.3表达液过滤除菌后得到的上清液,含60μg/ml MAb1和0.15%叠氮钠。
感兴趣组织可用免疫组化检测(IHC),冰冻切片或者福尔马林固定的石蜡包埋切片;也可组织降解后用流式分析法检测;或用WB检测。典型情况下,MAb1抗体经1:50稀释后,取100μl到组织切片上。然后加合适的二抗方法来检测Pimonidazole加合物。
使用指南:
1、 Animal Studies 动物研究
研究正常或肿瘤组织缺氧首先通过静脉注射(intravenous infusion)、腹腔注射(intraperitoneal injection)或口服(oral ingestion)法给Hypoxyprobe-1溶液,剂量为60mg/kg体重。比如,25g小鼠的探针用量为1.5mg/只小鼠。(高达400mg/kg的剂量用于小鼠无可见毒性或引起组织缺氧变化,但60mg/kg以最低成本给予良好的染色结果)。
给药后,Hypoxyprobe-1分布到包括大脑的所有组织,且仅仅在氧浓度≤14μM(相当于pO2=10mm Hg,37℃)的细胞内与蛋白质巯基形成加合物。除了肿瘤之外,正常组织如肝脏、肾脏和皮肤含pO2等于或低于10mm Hg的细胞,也会结合Hypoxyprobe-1。
2、Tissue cultures 组织培养
通常情况下,细胞悬液置于含100-200μM Hypoxyprobe-1的缺氧环境中孵育1-2h。之后细胞离心涂片、固定、MAb1和显色或荧光二抗染色。
订购信息:原装正品,现货供应。欢迎来电咨询,电话:021-54736159,18121428569;QQ:3308240863,2971634497。
货号 |
名称 | 目录价(元) | 货期 |
HP1-100Kit |
Hypoxyprobe Kit (100 mg pimonidazole HCl plus 1.0 ml of 4.3.11.3 mouse MAb) | 4784 | 现货 |
HP1-200Kit | Hypoxyprobe Kit (200 mg pimonidazole HCl plus 1.0 ml of 4.3.11.3 mouse Mab) | 9040 |
咨询 |
HP1-1000Kit | Hypoxyprobe Kit (1000 mg pimonidazole HCl plus 2 x 1.0 ml of 4.3.11.3 mouse MAb) | 16240 |
咨询 |
文件下载:
2、Hypoxyprobe frequently asked questions (FAQ) 常见问题
3、Hypoxyprobe Kit Application 应用文献
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】