描述
迄今为止,蒂姆的硫化银方法被认为是一种非常灵敏的技术,可用于证明金属离子,特别是中枢神经系统中的锌。该技术的原理是组织中的金属可以组织化学转化为金属硫化物。随后,金属硫化物通过还原剂催化将银离子还原为在光学或电子显微镜下可见的金属晶粒。
使用这种技术的研究不仅提供了对锌的定位和分布的更好理解,而且还了解了其在大脑中的可能功能1。但是,蒂姆硫化银染色的可靠性和复杂性一直是该技术广泛应用的主要障碍。
FD Rapid TimmStain™套件是根据Haug 1和Sloviter 2描述的方法设计的。FD快速TimmStain™试剂盒的试剂和步骤经过优化,可在实验动物的大脑中展示金属离子(尤其是锌)时达到高度的特异性和敏感性。该试剂盒可用于冷冻切片和石蜡切片。
套件内容:
第1部分(在4 o C下存储)
- 灌注液A 500毫升
- 灌注液B 500毫升
第2部分(存储在-20 o C)
- 溶液A 220毫升
- 溶液B 200毫升
- 溶液C 200毫升
- 溶液D 3毫升
- 塑料钳1
- 用户手册1
所需材料但不包括在内:
- 双重蒸馏水或去离子水
- 10%中性福尔马林缓冲液
- 0.1 M磷酸盐缓冲液(pH 7.4)
- 组织学用品和设备:
- 显微镜载玻片
- 盖玻片
- 染色罐
- 二甲苯或二甲苯替代品
- 树脂封固介质(例如Permount ®)
- 光学显微镜
Permount ®是Fisher Scientific公司的注册商标。
参考:
- Haug FMS. (1973) Heavy metals in the brain: a light microscope study of the rat with Timm’s sulphide silver method. Methodological considerations and cytological and regional staining patterns. Springer-Verlag Berlin Heidelberg New York.
- Sloviter RS. (1982) A simplified Timm stain procedure compatible with formaldehyde fixation and routine paraffin embedding of rat brain. Brain Res. Bulletin. 8:771-4.