描述
DiIC12(3) perchlorate 细胞膜荧光探针
搜索关键词:
细胞膜荧光探针,DiI,DiO,DiD,DiR,DiA,CM-DiI,神经示踪,传统细胞膜荧光探针,CAS:75664-01-6;
订购信息:
产品名称 |
产品编号 | CAS NO | 规格 | 价格(元) |
DiIC12(3) perchlorate 细胞膜荧光探针 | MX4041-25MG | 75664-01-6 | 25mg |
1312 |
产品描述:
橙红色荧光、亲脂性碳菁染料-DiIC12(3),是DiI (DiIC18(3))(Cat#:MX4002-10MG)的短链类似物,能比DiI更轻易插入细胞膜。在水中呈弱荧光,一旦插入膜后发强荧光且光相对稳定。脂质环境中具极其高消光系数和短激发态寿命(~1ns)。一旦加入细胞中,染料横向扩散进入质膜。DiIC12(3)是一种亲脂性神经元示踪剂,通常用于标记神经元项目以及其它细胞(特别是内皮细胞)的脂质双分子层。
基本特性:
1)CAS NO:75664-01-6
2)化学名:3H-Indolium, 1-dodecyl-2-(3-(1-dodecyl-1,3-dihydro-3,3-dimethyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl)- 3,3-dimethyl-, perchlorate
3)同义名:1,1’-Didodecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindocarbocyanine perchlorate 1,1′-二(十二烷基)-3,3,3′,3′-四甲基吲哚碳菁高氯酸盐
4)分子式:C47H73N2O4Cl
5)分子量:765.55
6)纯度:≥95%(HPLC)
7)外观:固体
8)溶解性:溶于DMSO
9)Ex/Em:549/565nm(in DMSO)
10)化学结构式:
保存与运输方法
保存:-20°C避光干燥保存,至少1年有效。
运输:冰袋运输。
注意事项
1) 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
【注意】以下使用方法仅用作参考,可根据具体的实验条件做出调整。
染色液制备
1)储存液制备:用 DMSO或乙醇配置浓度1~5 mM的储存液。例如,取25mg DiIC12(3)(Mw:765.55 g/mol)溶于6.53ml 乙醇中,充分溶解,即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且要避光保存。
2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,调整到1~5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始,以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。
悬浮细胞染色
1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。
2)37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化以保证得到均一化的标记结果。
3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。
4)去除上清液,之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
5)再重复3),4)步骤两次。
贴壁细胞染色
1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2)从培养基中移走盖玻片,滤掉过量培养液,将盖玻片放在潮湿的小室内。
3)在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4)37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化以保证得到均一化的标记结果。
5)吸掉染色工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸走培养基。
显微镜检测
1)DiD,DiO,DiI和DiR滤光器的选择参见下表:
货号 | 荧光探针 | 最大激发/最大发射波长
(Ex/Em) |
滤光片编号 | |
Omega公司 | Chroma公司 | |||
MX4041-25MG | DiIC12(3) | 549/565 nm | XF108, XF32 | 41002, 31002 |
MX4001-10MG | DiO | 484/501 nm | XF100,XF23 41001, 31001 | 41001, 31001 |
MX4004-25MG | DiD | 644/663 nm | XF110, XF47 | 41008, 31023 |
MX4005-5MG | DiR | 748/780 nm | XF112 | 41009 |
2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
- a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
- b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
- c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005;
流式细胞仪检测
经DiO,DiIC12(3),DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1,FL2,FL3或FL4通道。
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——Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】