描述
琼脂糖结合的小麦胚芽凝集素 （WGA）使用4％琼脂糖珠制备。WGA的受体糖是N-乙酰氨基葡糖，优先结合该糖的二聚体和三聚体。WGA可以结合含有末端N-乙酰氨基葡萄糖或壳二糖的寡糖，这是许多血清和膜糖蛋白共有的结构。
特征
- 磁珠直径范围为45-165微米
- 基质在pH 3-11的溶液以及许多有机溶剂中均稳定
- 使用亲和纯化的凝集素制备固定化的凝集素
- 共价连接可保留凝集素活性并最大程度减少可能导致非特异性或疏水相互作用的构象变化
- Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠中浸出
- 共轭后无残留电荷。这样可以最大程度地减少与基质的非特异性结合
- 产品以1：1悬浮液的形式提供在缓冲液中
技术指标
| 单位大小 | 2毫升，5毫升，10毫升 |
|---|---|
| 应用领域 | 糖生物学，亲和色谱 |
| 推荐的存储 | 2-8°C请勿冻结 |
| 解 | 10 mM HEPES，pH 7.5，0.15 M NaCl，20 mM GlcNAc，0.08％叠氮化钠 |
| 推荐用法 | 使用前用缓冲液彻底清洗凝胶，以除去添加的稳定凝集素的糖。洗脱与该琼脂糖凝集素结合的糖结合物的推荐产品：糖蛋白洗脱液，目录 第ES-5100号。或者，可以使用0.5 M N-乙酰基-D-葡萄糖胺或几丁质水解物（目录号SP-0090）。对于那些对WGA具有很高亲和力的糖缀合物，可能有必要降低洗脱糖溶液的pH用乙酸调至pH 3.0。使用后，用数倍柱体积的缓冲盐水洗涤凝胶，然后将凝胶重悬在含有0.08％叠氮化钠的缓冲盐水中进行保存。 |
| 矩阵共轭 | 凝集素 |
| 糖特异性 | N-乙酰氨基葡萄糖 |
| 共轭 | 琼脂糖 |
技术信息
细菌细胞壁肽聚糖，几丁质，软骨糖胺聚糖和糖脂也可以结合WGA。还已报道天然WGA通过唾液酸残基与某些糖蛋白相互作用（参见琥珀酰WGA）。该凝集素用于胰岛素受体的纯化和神经元示踪。
琼脂糖结合* WGA使用我们的亲和纯化的凝集素制备。具有约2×10 7道尔顿的分子量排除极限的热稳定的交联的4％琼脂糖珠粒用作凝集素共价偶联的固相基质。严格控制凝集素在珠子上的附着，以保持凝集素的活性并使结合的凝集素的构象变化最小化，这可能导致非特异性离子或疏水相互作用。我们开发的将凝集素与琼脂糖珠偶联的技术在凝集素和基质之间插入了亲水性间隔臂。
与传统的溴化氰步骤相比，这种偶联方法具有以下优点：
- 保留了偶联凝集素的最大碳水化合物结合活性
- 链接在一定的pH值范围内稳定
- Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠中浸出
- 共轭后不存在残余电荷。这使与基质的非特异性结合最小化。
我们的琼脂糖结合凝集素以每毫升沉降珠恒定浓度的凝集素提供。选择每种凝集素的浓度以达到珠中存在的每毫克凝集素的最高糖缀合物结合能力。使用已知结合凝集素的糖蛋白测试每批次的结合能力。这为用户提供了指南，并确保了我们的琼脂糖结合凝集素的质量。
抑制/洗脱糖：通常需要几丁质水解产物或500 mM N-乙酰氨基葡糖，并需进行盐和/或酸洗脱
* 5 mg凝集素/ ml凝胶
