描述
使用我们的亲和纯化的凝集素制备琼脂糖结合的琥珀酰化WGA。据报道该衍生物具有与天然凝集素不同的性质。有证据表明，与天然形式不同，琥珀酰小麦胚芽凝集素不结合唾液酸残基，但保留了其对N-乙酰氨基葡糖的特异性。使用天然凝集素和琥珀酰化形式的缀合物可以提供区分唾液酸化糖缀合物和仅包含N-乙酰氨基葡糖结构的缀合物的系统。
特征
- 磁珠直径范围为45-165微米
- 基质在pH 3-11的溶液以及许多有机溶剂中均稳定
- 使用亲和纯化的凝集素制备固定化的凝集素
- 共价连接可保留凝集素活性并最大程度减少可能导致非特异性或疏水相互作用的构象变化
- 产品以1：1悬浮液的形式提供在缓冲液中
- 抑制/洗脱糖：几丁质水解物；或通常需要用盐和/或酸洗脱的500 mM N-乙酰氨基葡糖；或糖蛋白洗脱液（ES-5100）
技术指标
| 单位大小 | 2毫升，5毫升 |
|---|---|
| 应用领域 | 糖生物学，亲和色谱 |
| 推荐的存储 | 2-8°C请勿冻结 |
| 解 | 10 mM HEPES，pH 7.5，0.15 M NaCl，20 mM GlcNAc，0.08％叠氮化钠 |
| 推荐用法 | 使用前用缓冲液彻底清洗凝胶，以除去添加的稳定凝集素的糖。洗脱与该琼脂糖凝集素结合的糖结合物的推荐产品：糖蛋白洗脱液，目录 第ES-5100号。或者，可以使用0.5 M N-乙酰基-D-葡萄糖胺（GlcNAc）。对于那些对WGA具有很高亲和力的糖缀合物，可能有必要用乙酸将洗脱糖溶液的pH降至pH 3.0并增加GlcNAc的浓度。使用后，用数倍柱体积的缓冲盐水洗涤凝胶，然后将凝胶重悬在含有0.08％叠氮化钠的缓冲盐水中进行保存。 |
| 矩阵共轭 | 凝集素 |
| 糖特异性 | N-乙酰氨基葡萄糖 |
| 共轭 | 琼脂糖 |
技术信息
琼脂糖结合*，琥珀酰化的WGA是使用我们的亲和纯化的凝集素制备的。具有约2×10 7道尔顿的分子量排除极限的热稳定的交联的4％琼脂糖珠粒用作凝集素共价偶联的固相基质。严格控制凝集素在珠子上的附着，以保持凝集素的活性并使结合的凝集素的构象变化最小化，这可能导致非特异性离子或疏水相互作用。我们开发的将凝集素与琼脂糖珠偶联的技术在凝集素和基质之间插入了亲水性间隔臂。
与传统的溴化氰步骤相比，这种偶联方法具有以下优点：
- 保留了偶联凝集素的最大碳水化合物结合活性
- 链接在一定的pH值范围内稳定
- Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠中浸出
- 共轭后不存在残余电荷。这使与基质的非特异性结合最小化。
我们的琼脂糖结合凝集素以每毫升沉降珠恒定浓度的凝集素提供。选择每种凝集素的浓度以达到珠中存在的每毫克凝集素的最高糖缀合物结合能力。使用已知结合凝集素的糖蛋白测试每批次的结合能力。这为用户提供了指南，并确保了我们的琼脂糖结合凝集素的质量。
* 3 mg凝集素/ ml凝胶
