描述
琼脂糖结合的PNA使用我们的亲和纯化的凝集素制备。花生凝集素优先结合T抗原,T抗原是存在于许多糖缀合物(例如M和N血型,神经节苷脂以及许多其他可溶性的和与膜相关的糖蛋白和糖脂)中的半乳糖基(β-1,3)N-乙酰半乳糖胺结构。除某些例外,PNA的受体序列通常被唾液酸化,从而阻止凝集素与其受体寡糖结合(请参阅Jacalin)。即使不直接与受体糖结合的唾液酸也可能抑制结合。稀释剂中钙离子的存在可能通过中和邻近受体序列的唾液酸残基上的负电荷来增强PNA与受体的结合。
特征:
- 磁珠直径范围为45-165微米
- 基质在pH 3-11的溶液以及许多有机溶剂中均稳定
- 使用亲和纯化的凝集素制备固定化的凝集素
- Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠中浸出
- 共轭后无残留电荷。这样可以最大程度地减少与基质的非特异性结合
- 产品以1:1悬浮液的形式提供在缓冲液中
- 抑制/洗脱糖:200 mM半乳糖或糖蛋白洗脱溶液(ES-2100)
单位大小 | 2毫升,5毫升 |
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应用领域 | 糖生物学,亲和色谱 |
推荐的存储 | 2-8°C请勿冻结 |
解 | 的10mM HEPES,pH 7.5中,0.15M的NaCl,0.1mM的氯化钙2,20mM的半乳糖,0.08%叠氮化钠 |
推荐用法 | 使用前,用缓冲液彻底清洗凝胶,以除去添加的稳定凝集素的糖。建议使用含有0.1 mM CaCl 2和0.01 mM MnCl 2的缓冲液。洗脱与该琼脂糖凝集素结合的糖缀合物的推荐产品:糖蛋白洗脱液,目录 第ES-2100号。或者,可以使用pH 7.5的10 mM HEPES缓冲盐水中的200 mM半乳糖。对于对PNA亲和力非常高的糖缀合物,可能有必要用乙酸将洗脱糖溶液的pH降至pH 3.0。使用后,用数倍柱体积的缓冲盐水洗涤凝胶,然后将凝胶重悬在含有0.08%叠氮化钠的缓冲盐水中进行保存。 |
矩阵共轭 | 凝集素 |
糖特异性 | 半乳糖 |
共轭 | 琼脂糖 |
技术信息
PNA可用于区分正常组织和肿瘤组织,并用于评估移行粘膜的恶性肿瘤。此外,PNA结合可用于测量淋巴组织中的细胞成熟度,以区分人和实验动物中的各种淋巴细胞亚群,并测量许多疾病中淋巴样细胞的水平。PNA可用于小鼠干细胞的分级分离,以用于跨组织相容性障碍的骨髓移植。
PNA的主要细胞表面受体可能是无唾液酸GM 1神经节苷脂。由于PNA与该糖脂的抗体具有特异性,因此PNA和抗体可以在某些应用中互换使用。
琼脂糖结合* PNA使用我们的亲和纯化的凝集素制备。具有约2×10 7道尔顿的分子量排除极限的热稳定的交联的4%琼脂糖珠粒用作凝集素共价偶联的固相基质。严格控制凝集素在珠子上的附着,以保持凝集素的活性并使结合的凝集素的构象变化最小化,这可能导致非特异性离子或疏水相互作用。我们开发的将凝集素与琼脂糖珠偶联的技术在凝集素和基质之间插入了亲水性间隔臂。
与传统的溴化氰步骤相比,这种偶联方法具有以下优点:
- 保留了偶联凝集素的最大碳水化合物结合活性
- 链接在一定的pH值范围内是稳定的
我们的琼脂糖结合凝集素以每毫升沉降珠恒定浓度的凝集素提供。选择每种凝集素的浓度以达到珠中存在的每毫克凝集素的最高糖缀合物结合能力。使用已知结合凝集素的糖蛋白测试每批次的结合能力。这为用户提供了指南,并确保了我们的琼脂糖结合凝集素的质量。
* 5 mg凝集素/ ml凝胶