描述
使用我们的亲和纯化的凝集素可制备琼脂糖结合的Jacalin。Jacalin是一种凝集素，由四个各自约16 kDa的亚基组成。该凝集素似乎仅结合O-糖苷连接的寡糖，优选结构为半乳糖基（β-1,3）N-乙酰半乳糖胺。该结构（T抗原）是与花生凝集素（PNA）结合的寡糖。但是，与PNA不同，Jacalin将结合这种结构的单或二唾液酸化形式。该凝集素已用于纯化人IgA。该凝集素的特异性也提供了定位或分离具有O-糖苷连接的寡糖侧链的糖蛋白的机会。
特征
- 基质是热稳定的，交联的4％琼脂糖小珠，分子溶出度约为2×10 7道尔顿
- 磁珠直径范围为45-165微米
- 基质在pH 3-11的溶液以及许多有机溶剂中均稳定
- 使用亲和纯化的凝集素制备固定化的凝集素
- 产品以1：1悬浮液的形式提供在缓冲液中
技术指标
| 单位大小 | 10毫升 |
|---|---|
| 应用领域 | 糖生物学，亲和色谱 |
| 推荐储存 | 2-8°C请勿冻结 |
| 解 | 的10mM HEPES，pH 7.5中，0.15M的NaCl，0.1mM的氯化钙2，20mM的半乳糖，20mM的乳糖，0.08％叠氮化钠 |
| 推荐用法 | 使用前，用缓冲液彻底清洗凝胶，以除去添加的稳定凝集素的糖。注意：为优化糖蛋白的洗脱，在使用前用10倍柱体积的175 mM TRIS，pH 7.5洗涤凝胶，应在此缓冲液中使用糖蛋白。洗脱与该琼脂糖凝集素结合的糖缀合物的推荐产品：糖蛋白洗脱液，目录 第ES-2100号。或者，可以使用pH值为7.5的175 mM TRIS中的0.1 M的半乳糖或0.8 M的半乳糖。使用其他缓冲液可能会降低洗脱的糖蛋白的产量。使用后，用数倍柱体积的缓冲盐水洗涤凝胶，然后将凝胶重悬在含有0.08％叠氮化钠的缓冲盐水中进行保存。 |
| 矩阵共轭 | 凝集素 |
| 糖特异性 | 半乳糖 |
| 共轭 | 琼脂糖 |
技术信息
琼脂糖结合* Jacalin使用我们的亲和纯化的凝集素制备。具有约2×10 7道尔顿的分子量排除极限的热稳定的交联的4％琼脂糖珠粒用作凝集素共价偶联的固相基质。严格控制凝集素在珠子上的附着，以保持凝集素的活性并使结合的凝集素的构象变化最小化，这可能导致非特异性离子或疏水相互作用。我们开发的将凝集素与琼脂糖珠偶联的技术在凝集素和基质之间插入了亲水性间隔臂。与传统的溴化氰步骤相比，这种偶联方法具有以下优点：
- 保留了偶联凝集素的最大碳水化合物结合活性
- 链接在一定的pH值范围内是稳定的
- Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠中浸出
- 共轭后不存在残余电荷。这使与基质的非特异性结合最小化。
我们的琼脂糖结合凝集素以每毫升沉降珠恒定浓度的凝集素提供。选择每种凝集素的浓度以达到珠中存在的每毫克凝集素的最高糖缀合物结合能力。使用已知结合凝集素的糖蛋白测试每批次的结合能力。这为用户提供了指南，并确保了我们的琼脂糖结合凝集素的质量。抑制/洗脱糖：800 mM半乳糖或100 mM蜜二糖或糖蛋白洗脱溶液（ES-2100）
* 4 mg凝集素/ ml凝胶
