描述
琼脂糖结合的Con A是使用我们的亲和纯化的凝集素制备的。Con A识别许多血清和膜糖蛋白中作为核心寡糖一部分的α-连接的甘露糖。在中性和碱性pH下,Con A以四个相同亚基的四聚体形式存在。低于pH 5.6,Con A分解为52 kDa的活性二聚体。乙酰化,琥珀酰化或其他衍生化也可以产生具有二聚体结构的稳定形式。(参见琥珀酰化的Con A)。由于种子内的水解损伤,序列中的切口通常存在于最纯的制剂中。特征
- 磁珠直径范围为45-165微米
- 基质在pH 3-11的溶液以及许多有机溶剂中均稳定
- 使用亲和纯化的凝集素制备固定化的凝集素
- 共价连接可保留凝集素活性并最大程度减少可能导致非特异性或疏水相互作用的构象变化
- 将亲水性间隔臂插入凝集素和基质之间
- Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠中浸出
- 共轭后无残留电荷。这样可以最大程度地减少与基质的非特异性结合
- 产品以1:1悬浮液的形式提供在缓冲液中
技术指标
单位大小 | 10毫升,100毫升 |
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应用领域 | 糖生物学,亲和色谱 |
推荐储存 | 2-8°C请勿冻结 |
溶液 | 10mM HEPES,pH 7.5中,0.15M的NaCl,0.1mM的氯化钙2,0.01毫摩尔的MnCl 2,20mM葡萄糖,0.08%叠氮化钠 |
推荐用法 | 使用前用缓冲液彻底清洗凝胶,以除去添加的稳定凝集素的糖。洗脱与该琼脂糖凝集素结合的糖缀合物的推荐产品:糖蛋白洗脱液,目录 第ES-1100号。或者,可以使用0.2Mα-甲基甘露糖苷/0.2Mα-甲基葡萄糖苷混合物。使用后,用数倍柱体积的缓冲盐水洗涤凝胶,然后将凝胶重悬在含有0.08%叠氮化钠的缓冲盐水中进行保存。 |
矩阵共轭 | 凝集素 |
糖特异性 | 甘露糖,葡萄糖 |
共轭 | 琼脂糖 |
技术信息
Con A在其四个糖结合位点的每一个处都需要钙或锰离子。尽管这些二价金属离子与多肽结构紧密结合,但是在稀释Con A时通常应避免使用会结合钙的缓冲液(例如磷酸盐),因为可能会逐渐失去活性。琼脂糖结合* Con A使用我们的亲和纯化的凝集素制备。具有约2×10 7道尔顿的分子量排除极限的热稳定的交联的4%琼脂糖珠粒用作凝集素共价偶联的固相基质。 与传统的溴化氰步骤相比,这种偶联方法具有以下优点:
- 保留了偶联凝集素的最大碳水化合物结合活性
- 链接在一定的pH值范围内稳定
我们的琼脂糖结合凝集素以每毫升沉降珠恒定浓度的凝集素提供。选择每种凝集素的浓度以达到珠中存在的每毫克凝集素的最高糖缀合物结合能力。使用已知结合凝集素的糖蛋白测试每批次的结合能力。这为用户提供了指南,并确保了我们的琼脂糖结合凝集素的质量。抑制/洗脱糖:200 mMα-甲基甘露糖苷/ 200 mMα-甲基葡萄糖苷或糖蛋白洗脱溶液的混合物(ES-1100)
* 6毫克凝集素/毫升凝胶