搜索关键词:
溶酶体(Lysosome);Acidic Organelle 酸性细胞器;MitoTracker;MitoSOX;LysoTracker;LysoSensor;溶酶体贮积症(Lysosome Storage Diseases,LSDs)
基本介绍:
溶酶体(Lysosome)又称为溶质体,是由单层膜围成的球状体,主要化学成分为脂类和蛋白质。溶酶体内富含几十种酸性水解酶,包括蛋白酶、核酸酶、磷酸酶、糖苷酶、脂肪酶、磷酸酯酶及硫酸酯酶等,能够控制多种内源性和外源性大分子物质的消化。因此,溶酶体具有溶解或消化功能,是物质代谢的场所。
溶酶体结构和功能异常引起的疾病称为溶酶体病。常见的有溶酶体相关的遗传性疾病,致病机理在于酸性水解酶合成基因突变引起酶合成障碍,造成溶酶体酶缺乏,从而致使相应酶代谢底物不能降解而积蓄在溶酶体中,造成细胞代谢障碍,形成溶酶体贮积症。溶酶体异常还与休克、类风湿关节炎、肿瘤等疾病发生有关联。
溶酶体系列探针:
一、LysoTracker Probes(酸性细胞器选择性的细胞膜渗透性探针)
1. 传统溶酶体探针的缺点:
弱碱性胺类选择性聚积在低pH的细胞区室(cellular compartments),可用来研究溶酶体的生物合成和发病机制。最常用的一种酸性细胞器探针为DAMP,本身无荧光,需要与抗DNP抗体联合使用,并直接或间接偶联到荧光素或酶上,从而可视化观察染色特征。荧光探针中性红和吖啶橙也常用来染酸性细胞器,即使无染色特异性。
2. LysoTracker溶酶体探针的优点
正是以上缺点促使我们开发替代性的酸性细胞器选择性探针,用于短期和长期示踪研究。
Lysotracker探针是向酸性荧光探针,用于活细胞内酸性细胞器的标记和示踪。这些探针具有几个重要特征,包括高度选择靶向酸性细胞器和纳摩尔浓度有效标记活细胞。另外,LysoTracker系列有几种荧光颜色,特别适合用于多色标记实验。
Lysotracker探针,含一连接到弱碱基上的荧光素,中性pH下呈部分质子化,能够自由穿透细胞膜且典型聚集在球形细胞器上。研究发现,Lysotracker探针必须在极低浓度(通常约50nM)下才能获得优异的选择性。这些探针的滞留(retention)机制虽然没有被完全研究透,但很可能与酸性细胞器的质子化和滞留性有关,即使后续的弱碱性细胞渗透化合物处理细胞通常不会可逆化染色结果。Lysotracker探针的内吞化动力学研究显示染料进入活细胞的摄入速率仅几秒即可。然而,这些溶酶体探针会导致溶酶体被碱化,比如长期孵育会诱使溶酶体pH的增加。因此,建议成像前用探针孵育细胞的时间仅1-5min就好。
3. LysoTracker溶酶体探针产品
我们提供5种Lysotracker探针,它们在光谱特性和使用特点上有所差异,具体见下表。
货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) | 规格 | 价格(元) |
L7525 | LysoTracker Blue DND-22 蓝色 | 373/422 | 20 x 50 µL | 4,992.00 |
L7526 | LysoTracker Green DND-26 绿色 | 504/511 | 20 x 50 µL | 4,968.00 |
L12491 | LysoTracker® Yellow-HCK-123 黄色 | 465/535 | 20 x 50 µL | 4,267.00 |
L7528 | LysoTracker® Red DND-99 红色 | 577/590 | 20 x 50 µL | 4,909.00 |
L12492 | LysoTracker® Deep Red 远红 | 647/668 | 5 x 50 µL | 3,696.00 |
以上所有产品均为Life(Invitrogen)原装正品,原始包装为20×50 µg(20支50µg单个包装构成)或5×50 µg(5支50µg单个包装构成)。我司对L7526,L7528进行拆开销售,特惠价为430元/支,单支50µl;另外对L12492进行拆开销售,单支50µl;现货销售,欢迎订购。
二、LysoSensor Probes(酸性细胞器选择性的pH指示剂)
1. 产品描述
为满足研究者研究活细胞内溶酶体生成和功能的动力学特征,特此开发Lysosensor系列探针。
LysoSensor探针是一种区分酸性细胞器的荧光pH指示剂。该系列染料属于向酸性探针,能够聚集在呈质子化的酸性细胞器上。这一质子化过程使得因弱碱性侧链而封闭荧光的探针得以荧光释放,促使荧光信号增强。因此,LysoSensor探针遇酸后荧光信号呈现pH依赖性的增强。
2. LysoSensor溶酶体探针产品
我们提供3种Lysosensor探针,它们在光谱特性和使用特点上有所差异,具体见下表。
货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) | pKa | 规格 | 价格(元) |
L7533 | LysoSensor Blue DND-167 蓝色 | 373/425 | 5.1 | 20 x 50 µL | 4,174.00 |
L7535 | LysoSensor Green DND-189 绿色 | 443/505 | 5.2 | 20 x 50 µL | 4,225.00 |
L7545 | LysoSensor Yellow/Blue DND-160 蓝/黄色 | 384/540, 329/440 | 4.2 | 20 x 50 µL | 4,211.00 |
以上所有产品均为Life(Invitrogen)原装正品,原始包装为20×50 µl(20支50µl单个包装构成)。我司对L7545进行拆开销售,单支50µl,现货销售,欢迎订购。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】