细胞膜荧光探针 (Probes for cell membrane) 产品专题
（DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，Celltracker CM-DiI）
传统细胞膜探针：
A，DiI, DiO, DiD和DiR
DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料(Dialkylcarbocyanines)荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构，尤其是DiI，广泛用于活体和固定组织及细胞的神经元逆行性和顺行性示踪。
作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，最佳浓度条件下可将整个细胞染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。
四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。DiD可被633 nm氦-氖（He-Ne）激光激发，具有比DiI更长的激发和发射光波长，特别适合用于标记具本底荧光的细胞和组织。而，DiR在体内活体成像或者示踪中意义非凡，因其所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，并且在红外光范围内，其本底荧光水平很低。
B， DiA
DiA为亲脂性氨基苯乙烯基染料（dialkylaminostyryl dye），常用于神经元的示踪，可与DiI联合使用进行神经细胞的双色标记。研究发现，某些情况下当DiO不能标记固定组织时，DiA可得到良好标记效果。DiA与磷脂双层膜结合后，光谱迁移明显加强。正由其发射光谱非常广，在适当的滤光片下，可以绿色、橙色，甚至红色荧光被检测到。
产品订购信息：
| 货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) | 规格 | 价格（元） |
| MX4001-10MG | DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针 | 484/501 | 10mg | 558.00 |
| MX4002-10MG | DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针 | 550/567 | 10mg | 348.00 |
| MX4003-25MG | DiIC16(3) perchlorate 细胞膜橙红色荧光探针 | 550/567 | 25mg | 1088.00 |
| MX4004-25MG | DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针 | 644/663 | 25mg | 1048.00 |
| MX4005-5MG | DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针 | 748/780 | 5mg | 328.00 |
| MX4006-25MG | DiA 细胞膜荧光探针 | 491/613 | 25mg | 1188.00 |
改良的细胞膜探针：
C，CM-DiI（活细胞的多代示踪、固定细胞长期示踪）
CellTracker CM-DiI为DiI的衍生物，在DiI中加入了具有中度巯基反应特性的氯甲基取代物，后者能与细胞内含巯基的肽和蛋白结合，使得CM-DiI能够抵抗醛类的固定作用。CM-DiI在细胞固定、破膜及石蜡包埋的整个过程中均能很好的保留在细胞内，因此，与传统细胞膜探针DiI相比较，更适于固定后标本的长期示踪。其红色/绿色的光谱特征，使其可与绿色探针或者绿色荧光蛋白如GFP一起用于双标实验。
CellTracker CM-DiI具以下特征：a）使用方便，只需吸掉培养液，加入探针，30min孵育，显微成像；b）荧光信号至少可持续72h以上（一般3-6代），染料只传到子代细胞，不会染上邻近细胞。c）毒性很低，不会影响细胞增殖和活力。总而言之，CellTracker CM-DiI具有良好的示踪特征，对细胞无毒，稳定长效，染料很好保留在细胞内，生理pH荧光信号强。
研究证实，CM-DiI标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
细胞膜探针光谱和检测滤片：
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荧光探针 |
最大激发/最大发射波长 （Ex/Em） |
滤光片编号 |
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Omeaga公司 |
Chroma公司 |
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| DiI | 549/565nm | XF108, XF32 | 41002, 31002 |
| CM-DiI | 553/570nm | XF32 | 31002 |
| DiO | 484/501nm | XF100, XF2341001, 31001 | 41001, 31001 |
| DiD | 644/665nm | XF110, XF47 | 41008, 31023 |
| DiR | 750/780nm | XF112 | 41009 |
| DiA | 456/590nm | XF21 | 31024 |
产品订购信息：
| 货号 | 产品名称 | Ex/Em (nm) | 规格 | 价格（元） |
| MX4007-50UG | Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI（红色） | 553/570 | 1×50μg | 340.00 |
| MX4007-250UG | Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI（红色） | 553/570 | 5×50μg | 1360.00 |
| MX4007-500UG | Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI（红色） | 553/570 | 10×50μg | 2380.00 |
应用文献：
1. Hemmrich Ket al,Applicability of the dyes CFSE, CM-DiI and PKH26 for tracking of human preadipocytes to evaluate adipose tissue engineering.Cells Tissues Organs. 2006; 184(3-4):117-27.
2. Andrade W, et al, The use of the lipophilic fluorochrome CM-DiI for tracking the migration of lymphocytes.J Immunol Methods. 1996 Aug 14;194(2):181-9.
3. Schatteman GC, et al,Blood-derived angioblasts accelerate blood-flow restoration in diabetic mice.J Clin Invest. 2000 Aug; 106(4):571-8.
4. Foley-Comer AJ, et al, Evidence for incorporation of free-floating mesothelial cells as a mechanism of serosal healing.J Cell Sci. 2002 Apr 1;115(Pt 7):1383-9.
5. Djouad F, et al,Immunosuppressive effect of mesenchymal stem cells favors tumor growth in allogeneic animals.Blood. 2003 Nov 15;102(10):3837-44. Epub 2003 Jul 24.
6. Hosie KA, et al,Chronic excitotoxin-induced axon degeneration in a compartmented neuronal culture model.ASN Neuro. 2012 Feb 23;4(1). pii: e00076. doi: 10.1042/AN20110031.
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】